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使用全自动菌落计数仪进行工作时需要注意什么
发布时间:2018-08-28   点击次数:118次
        菌落总数是指食品经过处理,在一定条件下培养后,所得1 g或1 ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
  全自动菌落计数仪检样稀释及培养
  1.  以无菌操作,将检样25 g(或25 mL)剪碎以后,放于含有225 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预先置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,置灭菌均质器中以8 000 r/min—1 0000 r/mln的速度处理1 min做成1:10的均匀稀释液。
  2.  用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL,沿管劈徐徐注入台有9 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液,下同),振摇试管混合均匀,做成1:100的稀释液。
  3.  另取1 mL的灭菌吸管,按上项操作顺序作10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1 mL灭菌吸管。
  4.  根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择2—3个适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。
  5.  稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基[可放置在(45土1) ℃水浴锅内保温注入平皿15 mI一20 mL,并转动平皿位混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1 mL稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
  6.  待琼脂凝固后,翻转平板,置(36土1) ℃恒温箱内培养(48土2) h取出板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得I g(1 mL)样品所含菌落总数。
  三、菌落计算方法
  1.  平板菌落数的选择
  选取菌落数在30一300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,选取两个平扳平均数.其中一个平板有较大片状菌落生长时.则不宜采用,而应以无片菌落生长的平板计数作为该稀释度的菌落数。若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布2 fB均匀,可计算半个平板后乘2 U代表整个平皿菌落数。
  2.  稀释度的选择
  (1)应选择平均菌落数在30一300之间的稀释度,乘以稀释倍效,报告之(见表5-2例1)。
  (2)若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30一300之间,则视二者之比如何来决定。若其比值小应报告其平均数:若比值大于2,则报告其中较小的数字(见表5-2例2、例3)。
  (3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表5-2例4)。
  (4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌范数乘以稀释倍数报告之(见表5-2例5)。
  (5)若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之〔见表5-2例6〕。
  (6)若所有稀释度的平均菌落数均不在30一300之间,其中一部分大于300或小于30时,近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表5-2例7)。
  3.  菌落数的报告
  菌落数在100以刚t1按其实有数报告;大于100时,用二位有效数字,在二位有效数字后面的数字,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的0的个数,可用10的指数来表示,见表5-2“报告方式”一栏。
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  注意事项
  1.  平板培养计数法只能检出生长的活菌,不能检出样品中全部的细菌数,总是比实际生存在食品中的细菌数要少,这是因为食品中存在多种细菌,它们的生活特性各异,不可能在统一培养条件下全部生长出来。但是,仍能借此评定整个食品被细菌污染的程度,所以目前一般食品的卫生检验中都普遍采用这种方法。
  2.  平板菌落计数测定食品中的菌落总数,一般均采用中温培养,特别是已属于直接供食用的制成食品,因为这些食品卫生的要求,是严格防止消化道传染病病原菌和食物中毒病原菌污染,这些病原菌都属于嗜温性菌,因而测定细菌数时,采用中温培养是比较合理的。
  以上是菌落检样的操作步骤及使用注意事项,当然使用全自动菌落计数仪的话更加方便。

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