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浮游植物鉴定中叶绿素a的常规测定方法
发布时间:2018-10-16   点击次数:98次
        在浮游植物鉴定中,测出的叶绿素a的含量是表征浮游植物生物量的重要指标之一。通过测定浮游植物叶绿素,可掌握水体初级生产力情况,反映水体富营化程度。通常对淡水中叶绿素a的测定方法是采用《水和废水监测分析方法(第四版)》,即下面所用的规范方法。该方法实验提取过程操作略显繁琐,样品在分析过程中多次转移,易造成样品的缺失,影响浮游植物鉴定结果。在不影响丙酮萃取分光光度法原理的前提下,利用丙酮加热以提高萃取能力,并对若干个湖泊、湖库、河流水进行了对比实验。
  在改进的方法中,将步骤2的样品提取,从“取出干燥后的滤膜放入研钵,加入少量碳酸镁粉末和2~3mL90%丙酮,充分研磨提取叶绿素a。用离心机4000r/min离心20min。将上清液转入10mL比色管,用90%丙酮定容为10mL,摇匀。”改成“将干燥后的滤膜放入10mL具塞比色管中,加入少量的碳酸镁粉末,再加入90%丙酮10mL,旋紧管塞,于50℃恒温水浴锅中萃取5min。充分摇匀后,放入4℃冰箱在黑暗中浸渍提取5h。”
  通过两个方法得出的结论可看出,规范法操作步骤略显繁琐,在样品的研磨过程中,本来含量就低的样品极易损失,不易收集。丙酮易挥发的特性,又使得研磨不能持久太久,造成规范法的测定结果偏低。改进法利用丙酮加热提升了丙酮的萃取能力,延长浸渍时间,促进藻类细胞破裂,使更多的叶绿素a从细胞中释放出来。在整个过程中,提取物始终保持在密闭的比色管中,保持了定容的体积,确保了叶绿素a浓度的可靠性。实验证明,采用丙酮加热、延长提取时间的方法可以提高对叶绿素a的提取,简便易操作的特点更适用于大批样品的数据监测。

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